Лекарството прогресира пирогенал, като същевременно запазва неговата имуностимулираща активност
Изобретението се отнася до методи за имуностимуланти, лишени от такива странични ефекти, като прогенот. Съгласно изобретението воден разтвор на пирогенал, взет при концентрация 10-100 μg/ml, подложен на гама облъчване в доза 40 или 120 kGy (дискретни стойности). Ефект: методът осигурява елиминиране на прогеномата на пирогенал. 4 C.p. f-кристали.
Изобретението се отнася до аптека, по-специално до методи за имуностимуланти на основата на естествени полизахариди, и може да се използва за създаване на подходящи лекарствени състави.
Пирогените е сложно лекарство липополизахариди и полизахариди, изолирани от бактерии Pseudomomas aeruginosa и някои други микроорганизми (М. Д. Машковски. "Лекарствен продукт", част 2, стр. 174-175, М.: Медицина, 1988). Лекарството, използвано в хирургията при адхезивно заболяване, лечение на келоидни белези и контрактури; в урологията за лечение на стриктури на уретрата и уретерите, хроничен простатит и уретрит; в гинекологията - възпаление на матката; във венерологията като неспецифичен имуностимулант при комплиачен кератит и конюнктивит; в дерматологията - псориазис, стрептодермия, невродермит; в козметиката за лечение на големи кожни дефекти без образуване на груб белег; по алергология в терапия на бронхиална астма.
Въвеждането на пирогенал (интрамускулно) е придружено от повишаване на температурата (оттук и името: „piros“ на гръцки е „огън, топлина, генао“ - „генерира“). Конвенционално приложена доза, избрана така, че телесната температура да не се повишава повече от до 37,5-38 o С; в някои случаи обаче се забелязват зашеметяващи студени тръпки и треска (до 39,5 o (С) с главоболие и болки в кръста.
Показано е, че пирогените не само стимулират излъчването на противовъзпалителни монокини: интерлевкини-1 и -6, фактор на туморна некроза и други, но също така засилва фагоцитозата, ускорява образуването на антитела, интерферонът, с други думи, показва имуностимулираща активност ( вижте по-горе относно употребата му при лечение на сифилис). Наличието на странични ефекти (включително повръщане) сериозно ограничава медицинската употреба на пирогенал като имуностимулант и се насърчава да се намерят начини за елиминиране на токсичните (пирогенни) действия пирогенал.
Когато хидролизата на пирогенал с лека киселина [Angewandte Chemie (Intl. Ed18) е отстраняване на липоиден компонент (така нареченият липид А), отговорен за токсичността на пирогенала като цяло (DC Morrison, "Бактериални ендотоксини." - в: Отзиви на Infect. Болести. - 1983 том 5, Приложение 4, PP. S733-S747).
Целта на изобретението е да осигури метод за елиминиране на пирогеналния прогеном, като същевременно поддържа неговата имуностимулируща активност, - метод, който не изисква използването на агресивна или скъпа и рядка химическа реакция и би бил точен и лесен контрол на процеса.
Целта е постигната поради факта, че разтворът на прогенот на пирогенал, запазвайки имуностимулиращата си активност, осигурявайки физико-химични ефекти върху пирогени, във воден разтвор, този ефект се реализира под формата на гама облъчване при скорост на дозата 35- 45 или 115-125 GSR, докато първоначалната концентрация на липополизахарид се приема равна на 10-100 µg/ml и като източник на гама-лъчение, използвайки кобалт-60. В предпочитано изпълнение, облъчването се подлага на официален (фармакопеен) разтвор на пирогенална концентрация от 100 μg/ml при доза от 40 или 120 kGy.
Ефектите на лъчистата енергия върху полизахаридите извън "майчините" клетки и следователно незащитеният Typhi в доза 1 Mrad причинява значително разграждане ("Radiobiology", 1970, 10, стр. 468). Знайте тогава, че намаляването на имуногенността на кръвните клетки може да бъде постигнато чрез облъчване на UV светлина в доза 120-13500 j/m 2 (приложение EPO 229830) и в процеса на облъчване на клетки на бозайници с UV светлина (280 -320 nm, между 10 до 200 j/m 2) образуват гликопротеини, проявяващи имуносупресивна (имуносупресивна) активност (заявка ЕРО 489732). От друга страна, инактивирането на вирусни замърсители на човешкия левкоцитен интерферон се осигурява съгласно патента на Руската федерация 2080877 гама-облъчване в доза 15-25 kGy.
Установихме, че облъчването на пирогенал във воден разтвор на гама-лъчение в строго определени дози, придружено от загуба на пирогенал, неговото прогресиране, като същевременно се поддържат имуностимулиращи дейности, вероятно поради отстраняване на липид а или, най-вероятно, и други фрагменти от молекула пирогенал (в полза на последната идея е дискретният характер на облъчване: или 35-45 или 115-125 kGy, докато междинните дози този ефект не се нарича). Косвено това се потвърждава от изместването на профила на имуностимулиращата активност към активирането на b-лимфоцитите, след като Hamm е x2 ">
Пример 1. Официален разтвор на пирогенал, произведен в ампули от 1 ml с концентрация 100 µg/ml, подложен на гама облъчване от източник на кобалт-60 в доза 40 kGy.
Пример 2. Продължете аналогично на пример 1 с тази разлика, че дозата се увеличава до 120 kGy.
Пример 3. При безплодни мишки-мъже с тегло 18-20 g се оценява въздействието на разтвора, получен съгласно пример 1, върху хуморалния имунен отговор към еритроцитите на овце, както се оценява по титъра на хемаглутинина в серума и продуктивните клетки на антитела ( AFC) в далака на животни, имунизирани с овчи еритроцити. Титърът на хемаглутинина и броят на KLA се определят 6 дни след имунизацията, животните, оптималната доза овчи еритроцити, т.е. 510 8 еритроцити на мишка интраперитонеално. Броят на АОК се определя по метода на слайда Кънингам вкъщи. Разтворът се прилага интраперитонеално два пъти, с интервал от два дни, в доза от 5 и 10 μg/мишка, първото въвеждане - ден след имунизацията. Средната стойност (от 12) log 2 заглавие на хемаглутинина възлиза на 8,0, а броят на спленоцитите KLA 106 е 400 $, което съответства на стойностите за пирогеналния.
Пример 4. Зайци от породата чинчила osushestvljaem/kg и три зайци бяха използвани като контрол (доза пирогени от 50 mg/kg). Ректална термометрия, произведена с помощта на електронен термометър към разтвора, след 2, 6 и 8 часа след приложението. В случай на облъчен с разтвор пирогенал съответните стойности възлизат на 38,40,2 o/39,40,4 o/38,70,8 o/38,40,8 o, а в случай на пирогенал - 38,70, 7 o/40,30,5 o/39,60,2 o/38,40,2 o .
1. Лекарство за прогенозиране на пирогенал при запазване на имуностимулираща активност, включваща физико-химични ефекти върху пирогени, във воден разтвор, характеризиращо се с това, че експозицията се извършва под формата на гама облъчване в доза 35-45 или 115-125 парцал.
2. Методът съгласно п. 1, характеризиращ се с това, че първоначалната концентрация на пирогенал е избрана равна на 10-100 µg/ml.
3. Методът съгласно който и да е от параграфите. 1 и 2, характеризиращ се с това, че гама облъчването се извършва в доза от 40 или 120 kGy.
4. Методът съгласно който и да е от параграфите. 1-3, характеризиращ се с това, че гама облъчването се подлага на официален разтвор на пирогенални флакони.
5. Методът съгласно който и да е от параграфите. 1-4, характеризиращ се с това, че като източник на гама-лъчение се използва кобалт-60.